帶電粒子在電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現(xiàn)象,稱為電泳。利用帶電粒子在電場中移動速度不同,對混合物各組份進(jìn)行分離、純化和測定的技術(shù)稱為電泳技術(shù)。可分離的樣品即可以是大分子的蛋白質(zhì)、多糖、核酸,也可以是小分子的氨基酸,核苷等。電泳方式差別很大.但基本原理是一致的,即:待分離樣品中各種分子在同一pH下帶電性質(zhì)和帶電量以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異,使帶電分子在電場中產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)對樣品分離、鑒定或提純。
電泳的分類
不同種類的電泳實(shí)現(xiàn)方式和技術(shù)關(guān)鍵各不相同,紛繁復(fù)雜:目前,尚沒有任何一種分類體系可以做到不重復(fù)的涵蓋所有電泳方式。綜合考慮支持物類型、電泳原理、用途等因素的系統(tǒng)分類方法簡單清晰,而且主要的電泳種類都能在該體系中找到自己的位置。
按是否使用支持物分為:
此類電泳也稱自由電泳。電泳方式是直接將待測樣品溶于適當(dāng)?shù)木彌_液中,酸洗槽表面處理在緩沖液兩端通電,形成電場,帶點(diǎn)粒子在溶液中自由泳動達(dá)到分離的效果。包括Tise-leas式微量電泳、顯微電泳、等電聚焦電泳、等速電泳及密度梯度電泳等。自由電泳由于電泳儀構(gòu)造復(fù)雜、體積龐大,操作要求嚴(yán)格,價格昂貴等原因,發(fā)展比較緩慢。往往只有當(dāng)其他技術(shù)難以滿足分析、分離要求時才會選擇自由電泳,如等電聚焦電泳是準(zhǔn)確測量蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的無可替代的方法。
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